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    人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA免费代测试剂盒?操作步骤
    点击次数:76 发布时间:2022-10-08

    人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA免费代测试剂盒操作步骤:


    1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。


    800 ng/L                           5号标准品                  150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液


    400 ng/L                           4号标准品                   150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液


    200 ng/L l                         3号标准品                   150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液


    100 ng/L                           2号标准品                   150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液


    50 ng/L                             1号标准品                     150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


    2. 加 样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样 品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   


    4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用


    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。


    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。


    7. 温育:操作同3。


    8.洗涤:操作同5。


    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.


    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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